První den v nové práci. Člověk si přeje, aby šlo všechno hladce. Jenže přání je jedna věc, realita úplně jiná. A jak se nakonec ukáže, přijít pozdě do práce, ve které se vaši kolegové změní v bezduché zombie lačnící po vaší krvi, není až takový problém. Problém bude dostat se z ní živý.

Příslušníci speciálních jednotek S.T.A.R.S. mají takové pořekadlo: „Vyhodíš ho oknem, vrátí se ti dveřmi. Vyhoď ho do vzduchu a už se nikdy nevrátí!“ Přesně v tomto duchu zlikvidovali v předchozím dílu série Resident Evil s názvem Konspirace Umbrella pokusnou laboratoř plnou zmutovaných lidí nápadně připomínající zombie. Umbrella je však tvrdohlavá společnost, a tak velmi rychle začne testovat svoji biologickou zbraň na novém, utajeném místě.

V Raccoon City zavládla panika. Poklidné, odlehlé město zajímavé pouze tím, že si zde své detašované pracoviště zřídila nadnárodní korporace Umbrella, se stává místem záhadných vražd. Místní policie při vyšetřování vykazuje známky odhodlání, zatímco oběti vykazují při ohledání známky ohlodání. Začínají se šířit drby o kultech kanibalů i divokých zvířatech. A protože pouhé odhodlání k vyšetření případu nestačí, nezbývá než povolat S.T.A.R.S. – tedy speciální jednotky, aby se případu ujaly.